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          懸浮細胞和貼壁細胞基礎知識介紹

          更新時間:2024-03-16   點擊次數:140次

          體外培養細胞,根據它們是否能貼附在支持物上生長的特性,可分為懸浮型貼壁型兩大類。

          (一)懸浮型細胞

          簡稱懸浮細胞。在體外培養時,這些細胞屬于非貼壁依賴的細胞,這些細胞的細胞質膜也會與培養液底發生黏連,但最多不超過5%的表面與培養液底發生類似于細胞連接樣的黏連,顯微視場下細胞往往呈球形。

          懸浮型細胞主要是來源于血液、淋巴組織的細胞,骨髓瘤構建的各種雜交瘤細胞,某些腫瘤細胞和轉化細胞。

          細胞呈圓形,一般不貼于支持物上,呈懸浮生長。這類細胞容易大量繁殖。

          體外培養的細胞類型中,少數細胞種類在培養時不貼附于支持物上,而以懸浮狀態生長,包括一些取自血、脾或骨髓的原代細胞,尤其是血液白細胞,以及一些腫瘤細胞。某些來源于此類細胞的細胞株或細胞系也呈懸浮狀態生長。

          細胞懸浮生長時可以呈單個細胞或細小的細胞團,胞體為圓形。其優點是在培養液中生長,生存空間大,允許長時間生長,便于大量繁殖。

          屬于懸浮型細胞常見的細胞株系有小鼠腹水瘤S180、小鼠骨髓瘤NS1和SP2/0,人造血系腫瘤細胞U937(見文章結尾圖片)、HL60、K562(見文章結尾圖片)等。技術詳情聯系靶點科技技術支持。

          (二)貼壁型細胞

          簡稱貼壁細胞。在體外培養時,貼壁型細胞就是那些貼壁依賴的細胞,在匯合成單層生長以前,它們的細胞質膜超過30%的表面與培養液底發生類似與細胞連接樣的黏連,顯微視場下細胞一般為扁平狀的各種形態。需要注意的是,貼壁型細胞匯合生長形成單層以后,失去接觸抑制的那些細胞株或細胞系的細胞培養物中,常??梢娀蚨嗷蛏俚膽腋蛹毎霈F。

          貼壁型細胞包括大多數哺乳動物的淋巴和血液以外的組織細胞,以及多數腫瘤細胞。需要貼附在帶適量正電荷的固體或半固體表面才能正常生長和分裂。
          大多數培養細胞均為貼壁型,它們必須貼附在支持物表面生長,這類細胞在體內時各自具有其特殊的形態,但在體外培養時貼附于支持物后形態上表現單一化而失去體內原有的某些特征,多呈上皮樣或成纖維細胞樣。

          正常貼壁型細胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性,細胞相互接觸后可抑制細胞的運動,因此細胞不會相互重疊于其上面生長。細胞生長、匯合成片后,雖發生接觸抑制,但只要營養充分,仍可增殖分裂,但當細胞數量達到一定密度后,由于營養的枯竭和代謝物的影響,細胞分裂停止,稱為密度抑制。

          腫瘤細胞的接觸抑制及密度抑制往往減弱或消失,因此細胞可向三維空間發展,導致細胞堆積,并可生長至較高的終末細胞密度。

          貼壁細胞類型有以下幾種常見類型

          1.成纖維細胞型

          細胞呈梭形、扇形、星形或不規則三角形,中央有卵圓形核,胞質常向外伸出3-5個長短不一的突起,生長時呈放射狀。細胞匯合過程中,細胞的生長呈放射狀、火焰狀或漩渦狀。

          除了真正的成纖維細胞外,凡由中胚層間充質起源的組織,如心肌、平滑肌、成骨細胞、血管內皮等常呈成纖維細胞形態。培養中細胞的形態與成纖維細胞類似時皆可稱之為成纖維細胞(圖10-2)。

          2.上皮型細胞

          細胞呈扁平不規則多邊形,中央有圓形核,細胞外觀透明,細胞彼此緊密相連成單層生長。生長時呈膜狀移動,處于膜邊緣的細胞總與膜相連,很少單獨行動。起源于內、外胚層的細胞如皮膚表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形態。上皮細胞傳代培養后形態特征逐漸趨于典型。

          3.游走細胞型

          呈散在生長,一般不連成片,胞質常突起,呈活躍游走或變形運動,速度快且方向不規則。此型細胞不穩定,有時難以和其他細胞相區別。起源于網狀內皮系統的細胞屬于此類型。

          4.多型細胞型

          有一些細胞,如神經細胞難以確定其規律和穩定的形態,統歸于此類。此類細胞在培養時,其形態結構容易受培養條件(基質、溫度、pH、營養、污染狀況和培養方式等)影響。

          如角膜上皮細胞在膠原基質上的形態與體內天然形態相似,但在塑料基質表面細胞呈單層生長,細胞呈扁平形。上皮型Hela細胞在偏酸或偏堿的培養環境下會停止生長,細胞形態呈梭形、不規則形,及時糾正pH后,細胞又恢復原來的正常形態。

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